.jpg)
HUBUNGAN STRUKTUR AKTIVITAS OBAT ANTIKANKER
13 tahun yang lalu
Sabtu, 02 Oktober 2010
Jumat, 03 September 2010
Jumat, 05 Februari 2010
MONOKLONAL ANTIBODI
BAB I
PENDAHULUAN
Antibodi monoklonal adalah zat yang diproduksi oleh sel gabungan tipe tunggal yang memiliki kekhususan tambahan. Ini adalah komponen penting dari sistem kekebalan tubuh. Mereka dapat mengenali dan mengikat ke antigen yang spesifik. Pada teknologi antibodi monklonal, sel tumor yang dapat mereplikasi tanpa henti digabungkan dengan sel mamalia yang memproduksi antibodi. Hasil penggabungan sel ini adalah hybridoma, yang akan terus memproduksi antibodi. Antibodi monoklonal mengenali setiap determinan yang antigen (bagian dari makromolekul yang dikenali oleh sistem kekebalan tubuh / epitope). Mereka menyerang molekul targetnya dan mereka bisa memilah antara epitope yang sama. Selain sangat spesifik, mereka memberikan landasan untuk perlindungan melawan patogen. Antibodi monoklonal sekarang telah digunakan untuk banyak masalah diagnostik seperti :
1. mengidentifikasi agen infeksi,
2. mengidentifikasi tumor, antigen dan antibodi auto,
3. mengukur protein dan level drug pada serum,
4. mengenali darah dan jaringan,
5. mengidentifikasi sel spesifik yang terlibat dalam respon kekebalan dan mengidentifikasi serta mengkuantifikasi hormon.( http://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1811523-antibodi-monoklonal-strategi-melawan-kanker/)
Terapi antibodi monoklonal merupakan bentuk pasif dari imunoterapi, karena antibodi dibuat dalam kuantitas besar di luar tubuh (di laboratorium). Jadi terapi ini tidak membutuhkan sistem imun pasien untuk bersikap aktif melawan kanker.
Antibodi diproduksi secara masal dalam laboratorium dengan menggabungkan sel myeloma (tipe kanker sumsum tulang) dari sel B mencit yang menghasilkan antibodi spesifik. Sel hasil penggabungan ini disebut hybridoma.
Kombinasi sel B yang bisa mengenali antigen khusus dan sel myeloma yang hidup akan membuat sel hibridoma menjadi semacam pabrik produksi antibodi yang tidak ada habisnya. Karena semua antibodi yang dihasilkan identik, berasal dari satu (mono) sel hibridoma, mereka disebut antibodi monoklonal (kadang disingkat MoAbs atau MAbs).
Ilmuwan bisa membuat antibodi monoklonal yang mampu bereaksi dengan antigen spesifik berbagai jenis sel kanker. Dengan ditemukannya lebih banyak lagi antigen kanker, berarti akan semakin banyak antibodi monoklonal yang bisa digunakan untuk terapi berbagai jenis kanker.
BAB II
PEMBAHASAN
A. Metode Produksi Antibodi monoklonal
Monoklonal antibodi (mAb) reagen penting digunakan dalam penelitian biomedis, dalam diagnosis dan pengobatan penyakit seperti infeksi dan kanker. Antibodi ini diproduksi oleh sel garis atau klon yang diperoleh dari hewan yang telah diimunisasi dengan substansi yang merupakan subyek. Untuk menghasilkan mAb yang diinginkan, sel-sel harus ditumbuhkan dalam salah satu dari dua cara: melalui suntikan ke dalam rongga perut yang sesuai disiapkan sebuah tikus atau dengan kultur jaringan sel dalam botol plastik.
Metode tikus/mouse umumnya dikenal, dipahami dengan baik, dan banyak tersedia di banyak laboratorium; tetapi perlu hati-hati tikus menonton untuk meminimalkan rasa sakit atau tertekan bahwa beberapa baris sel yang berlebihan mendorong oleh akumulasi cairan (asites) di perut atau oleh invasi viscera.
Produksi antibodi monoklonal melibatkan in vivo atau in vitro prosedur atau kombinasi dari padanya. Sebelum produksi antibodi oleh metode tersebut, sel-sel hibrid yang akan menghasilkan antibodi yang dihasilkan.
B. Langkah-langkah dalam memproduksi sel-sel tersebut adalah sebagai berikut :
Langkah 1:
Imunisasi Mice dan Pemilihan Mouse Donatur untuk Generasi Hybridoma Sel
Tikus diimunisasi dengan antigen yang disiapkan untuk injeksi emulsifying baik oleh antigen dengan ajuvan lain atau dengan homogenisasi irisan gel yang berisi antigen. Intact Utuh sel, seluruh membran dan mikroorganisme kadang-kadang digunakan sebagai immunogens. Di hampir semua laboratorium, tikus yang digunakan untuk menghasilkan antibodi yang diinginkan. Secara umum, tikus diimunisasi setiap 2-3
minggu, tetapi protokol imunisasi bervariasi di antara peneliti. Ketika Titer antibodi yang cukup tercapai
dalam serum, tikus yang diimunisasi dieuthanasia dan limpa dihapus untuk digunakan sebagai sumber sel untuk fusi dengan sel-sel myeloma.
Langkah 2:
Pemutaran dari Mouse untuk Produksi Antibodi Setelah beberapa minggu imunisasi, sampel darah yang diperoleh dari tikus untuk pengukuran serum antibodi manusiawi Beberapa teknik telah dikembangkan untuk pengumpulan darah volume kecil. Titer antibodi serum ditentukan dengan berbagai teknik, seperti:
enzim-linked Immunosorbent assay (ELISA) dan aliran cytometry. Jika titer antibodi tinggi, fusi sel dapat dilakukan. Jika Titer terlalu rendah, tikus dapat mendorong sampai respon yang memadai tercapai, Ketika Titer antibodi cukup tinggi, tikus yang umumnya
didukung dengan menyuntikkan antigen tanpa ajuvan intraperitoneally atau intravena (melalui vena ekor) 3 hari sebelum fusi tetapi 2 minggu setelah imunisasi sebelumnya. Kemudian tikus dieuthanasia dan limpa dihapus karena in vitro produksi sel hybridoma.
Langkah 3:
Persiapan Myeloma Cel
Sekering antibodi yang memproduksi sel-sel limpa, yang memiliki hidup terbatas, dengan sel-sel yang berasal dari abadi tumor limfosit (myeloma) menghasilkan hybridoma yang mampu pertumbuhan terbatas Sel-sel myeloma diabadikan sel yang berbudaya dengan 8-azaguanine untuk memastikan kepekaan terhadap mereka hypoxanthine-aminopterin-timidin (HAT) pilihan media yang digunakan setelah fusi sel 1, seminggu sebelum sel fusi, sel-sel myeloma ditanam di 8-azaguanine.
Langkah 4:
Fusion of Myeloma Cells dengan Limpa Immune Cel
Sel Tunggal limpa dari tikus yang diimunisasi adalah melebur dengan sel myeloma disiapkan sebelumnya Fusion dicapai oleh rekan-centrifuging baru dipanen sel-sel limpa dan sel-sel myeloma polietilenglycol, suatu zat yang menyebabkan membran sel untuk sumbu. Seperti tercantum dalam langkah 3, hanya sel-sel melebur akan tumbuh dalam media seleksi khusus. Sel-sel kemudian didistribusikan ke 96 piring berisi.
Sel pengumpan diturunkan dari salin mencuci peritoneum tikus. dipercaya untuk memasok faktor-faktor yang mendorong pertumbuhan sel hybridoma (Quinlan dan Kennedy 1994). Komersial persiapan bahwa hasil dari koleksi media mendukung pertumbuhan sel-sel berbudaya dan mengandung faktor pertumbuhan yang tersedia yang dapat digunakan sebagai pengganti mouse yang diturunkan dari sel-sel feeder. Hal ini juga memungkinkan untuk menggunakan murine yang diturunkan dari sumsum tulang makrofag sebagai sel feeder (Hoffman dan lain-lain 1996)
Langkah 5:
Mengkloning dari Hybridoma Cell Lines oleh "Membatasi Pengenceran" atau Perluasan dan Stabilisasi
Production Klon oleh asites Produksi
Pada langkah ini baru, hybridoma kelompok kecil sel-sel dari 96 piring dengan baik dapat tumbuh dalam jaringan budaya diikuti dengan seleksi untuk mengikat antigen atau tumbuh oleh metode asites mouse dengan kloning pada waktu. Kloning oleh "membatasi pengenceran" saat ini menjamin bahwa mayoritas sumur masing-masing mengandung paling banyak satu klon tunggal. Penilaian yang cukup besar diperlukan pada tahap ini untuk memilih hybridomas mampu ekspansi versus total kerugian dari produk fusi sel karena underpopulation atau tidak memadai dalam pertumbuhan vitro tinggi. Dalam beberapa kasus, antibodi yang dikeluarkan beracun bagi sel rapuh dipertahankan in vitro. Optimizing Mengoptimalkan asites mouse metode ekspansi pada tahap ini dapat menyimpan sel. Itu adalah pengalaman dari banyak bahwa singkat pertumbuhan dengan metode asites mouse sel menghasilkan baris yang di kemudian in vitro dan in vivo tahap menunjukkan sifat tahan banting dan optimal meningkatkan produksi antibodi (Ishaque dan Al-Rubeai 1998). Panduan dipublikasikan untuk membantu peneliti dalam menggunakan metode asites mouse dengan cara ini (Jackson dan Fox 1995). (1)
C. Terapi antibodi monoklonal
1. Antibodi monoklonal
Penggunaan antibodi monoklonal (atau mAb) untuk secara khusus mengikat sel sasaran, ini memungkinkan kemudian pasien merangsang sistem kekebalan tubuh untuk menyerang sel-sel patogen.
Sebagai contoh: mAb terapi dapat digunakan untuk menghancurkan tumor ganas sel dan mencegah pertumbuhan tumor dengan menghambat reseptor sel spesifik.
Ada sejumlah cara yang dapat digunakan untuk terapi.Adalah mungkin untuk menciptakan mAb khusus untuk hampir semua ekstraselular / permukaan sel sasaran, dan dengan demikian ada sejumlah besar penelitian dan pengembangan yang saat ini sedang menjalani proses menciptakan monoclonal untuk berbagai penyakit serius (seperti rheumatoid arthritis, multiple sclerosis dan berbagai jenis kanker). Variasi juga ada dalam perawatan ini, misalnya radioimmunotherapy, di mana radioaktif dosis localizes pada garis sel target, memberikan dosis kimia mematikan ke sasaran. [2]
2. Struktur dan fungsi manusia dan terapeutik antibodi
Imunoglobulin G (IgG) antibodi besar heterodimeric molekul, sekitar 150 kDa dan terdiri dari dua macam polipeptida rantai, disebut berat (~ 50kDa) dan rantai ringan (~ 25kDa).
Ada dua jenis rantai cahaya, kappa (κ) dan lamda (λ). Dengan pembelahan dengan enzim papain, yang Fab (fragmen antigen-mengikat) bagian dapat dipisahkan dari Fc (fragmen kristal) bagian dari molekul (lihat gambar). Fragmen Fab berisi variabel domain, yang terdiri dari tiga hypervariable asam amino domain yang bertanggung jawab atas spesifisitas antibodi tertanam ke daerah konstan.
Ada empat subkelas IgG yang dikenal semua yang terlibat dalam selular tergantung Antibodi-cytotoxicity. [3] Sistem kekebalan merespon faktor-faktor lingkungan itu menemukan berdasarkan diskriminasi antara diri sendiri dan non-self. Tumor sel-sel yang tidak secara khusus ditargetkan oleh salah satu sistem kekebalan tubuh karena sel tumor adalah sel-sel pasien sendiri.
Sel-sel tumor, tetapi sangat tidak normal, tidak biasa dan banyak menampilkan antigen yang tidak sesuai baik untuk tipe sel, lingkungan, atau hanya biasanya hadir dalam organisme 'pembangunan (misalnya janin antigen). [3]
Sel tumor lain menampilkan reseptor permukaan sel yang jarang atau tidak ada pada permukaan sel-sel sehat, dan yang bertanggung jawab untuk mengaktifkan selular transduksi sinyal jalur yang menyebabkan pertumbuhan yang tidak diatur dan pembagian sel tumor. Contohnya termasuk ErbB2, sebuah konstitutif aktif reseptor permukaan sel yang abnormal diproduksi di tingkat tinggi di permukaan sekitar 30% dari kanker payudara sel tumor. Seperti kanker payudara yang dikenal sebuah HER2 positif kanker payudara. [4]
Antibodi adalah komponen kunci dari respon imun adaptif, memainkan peran sentral dalam baik dalam pengakuan terhadap antigen asing dan stimulasi respon imun kepada mereka. Munculnya antibodi monoklonal teknologi telah memungkinkan untuk meningkatkan antibodi terhadap antigen tertentu disajikan pada permukaan tumor.
D. Asal terapi antibodi monoklonal
1. Antibodi monoklonal untuk kanker.
Antibodi yang diarahkan prodrug terapi enzim; ADCC, tergantung antibodi yang diperantarai sel-cytotoxicity; CDC, melengkapi tergantung cytotoxicity; MAB, monoklonal antibodi; scFv, Fv rantai tunggal fragmen. [5]
Immunotherapy dikembangkan sebagai suatu teknik dengan penemuan struktur antibodi dan pengembangan hybridoma teknologi, yang menyediakan sumber terpercaya pertama monoklonal antibodi. [6] kemajuan ini diperbolehkan untuk penargetan tumor tertentu baik secara in vitro dan in vivo. Penelitian awal ganas neoplasma ditemukan MAB terapi yang terbatas dan umumnya berumur pendek sukses dengan keganasan darah. [7] [8] Selain harus perawatan secara khusus disesuaikan dengan masing-masing pasien, sehingga terbukti tidak praktis untuk rutin klinis .
Sepanjang perkembangan monoklonal pengembangan obat ada empat jenis antibodi utama dikembangkan: murine, chimeric, humanised dan manusia. Awal terapeutik antibodi murine sederhana analog, yang menyebabkan kurangnya awal kesuksesan.
Sejak itu telah menunjukkan bahwa antibodi ini memiliki: pendek paruh in vivo (karena kompleks imun pembentukan), terbatas penetrasi ke situs tumor, dan bahwa mereka tidak cukup merekrut fungsi efektor tuan rumah. [9] Untuk mengatasi kesulitan-kesulitan ini masalah teknis awalnya berpengalaman harus dilampaui.
Antibodi Chimeric dan manusiawi diganti murine umumnya antibodi dalam aplikasi antibodi terapi modern. Teknologi Hybridoma telah digantikan oleh teknologi DNA rekombinan, transgenik tikus dan tampilan fag. [10] Pemahaman proteomics telah terbukti penting dalam mengidentifikasi tumor novel target.
2. Antibodi monoklonal murine (akhiran ~ omab)
Awalnya, murine antibodi yang diperoleh oleh hybridoma teknologi, yang Kohler dan Milstein menerima hadiah Nobel. Namun ketidaksamaan antara murine dan sistem kekebalan tubuh manusia menyebabkan kegagalan klinis antibodi ini, kecuali dalam keadaan tertentu.
Masalah utama yang berhubungan dengan antibodi murine termasuk mengurangi rangsangan cytotoxicity dan terbentuknya administrasi kompleks setelah berkali-kali, yang mengakibatkan ringan reaksi alergi dan kadang-kadang anafilaksis shock. [9]
3. Chimeric dan monoklonal antibody manusia (akhiran ximab, ~ zumab masing-masing)
Untuk mengurangi antibodi murine imunogenisitas, murine molekul yang direkayasa untuk menghapus konten imunogenik dan untuk meningkatkan efisiensi kekebalan. [9] ini awalnya dicapai oleh produksi chimeric dan manusiawi antibodi. Antibodi Chimeric terdiri dari variabel murine daerah menyatu ke daerah konstan manusia
Urutan gen manusia, diambil dari cahaya kappa rantai dan rantai berat IgG1, menghasilkan antibodi yang kira-kira 65% manusia. Hal ini akan mengurangi imunogenisitas, dan dengan demikian meningkatkan serum paruh.
Antibodi manusia diproduksi oleh mencangkok murine hypervariable asam amino domain dalam antibodi manusia. This results in a molecule of approximately 95% human origin. Ini menghasilkan molekul sekitar 95% asal-usul manusia. Namun hal itu telah ditunjukkan dalam beberapa studi yang mengikat antigen antibodi humanised jauh lebih lemah daripada antibodi monoklonal murine orangtua, dengan melaporkan penurunan afinitas sampai beberapa seratus kali lipat. [10] Peningkatan antibodi-antigen kekuatan mengikat telah dicapai dengan memperkenalkan mutasi ke daerah menentukan saling melengkapi (CDR) , dengan menggunakan teknik seperti rantai-shuffling, pengacakan saling melengkapi penentuan daerah dan generasi dari perpustakaan antibodi dengan variabel mutasi dalam daerah dengan rawan kesalahan PCR, E-coli strain mutator , dan situs-mutagenesis spesifik. [1]
4. Antibodi monoklonal Manusia
Antibodi monoklonal manusia yang diproduksi menggunakan transgenik tikus atau tampilan fag perpustakaan.
Antibodi monoklonal manusia yang diproduksi dengan mentransfer gen imunoglobulin manusia ke dalam genom murine, setelah mana mouse transgenik vaksinasi terhadap antigen yang diinginkan, menyebabkan produksi antibodi monoklonal. [10] memperbolehkan transformasi murine antibodi in vitro menjadi manusia sepenuhnya antibodi . [4]
E. Persetujuan FDA Terhadap terapi antibodi
Pertama terapi yang disetujui FDA adalah antibodi monoklonal murine spesifik IgG2a CD3 penolakan transplantasi obat, OKT3 (juga disebut muromonab), pada tahun 1986.
Contoh terapi antibodi monoklonal yang disetujuia FDA
Sebagian besar berkaitan dengan target imunologi dan kanker. penemuan obat ini digunakan dalam padat transplantasi organ penerima yang menjadi steroid resisten.
Antibodi Merek Tanggal persetujuan Tipe Target Indikasi
(Apa itu disetujui untuk mengobati)
Abciximab
ReoPro 1994 chimeric penghambatan glikoprotein IIb / IIIA Kardiovaskular
Adalimumab
Humira 2002 manusia inhibisi dari TNF-α signaling Beberapa gangguan auto-imun
Alemtuzumab
Campath 2001 manusiawi CD52
Leukemia limfositik kronis
Basiliximab
Simulect 1998 chimeric IL-2Rα reseptor (CD25)
Penolakan transplantasi
Bevacizumab
Avastin 2004 manusiawi Vascular endothelial growth factor (VEGF)
Kanker kolorektal
Cetuximab
Erbitux 2004 chimeric faktor pertumbuhan epidermal reseptor
Kanker kolorektal, kanker Kepala dan leher
Certolizumab pegol
Cimzia 2008 manusiawi signaling inhibisi dari TNF-α signaling Crohn
Tabel 1. Contoh Produk Antibodi monoklonal
1. Radioimmunotherapy (RIT)
Radioimmunotherapy melibatkan penggunaan radioaktif murine dikonjugasikan antibodi terhadap antigen selular. Sebagian besar penelitian saat ini terlibat aplikasi mereka untuk limfoma, karena ini sangat radio sensitive. Untuk membatasi paparan radiasi, murine antibodi secara khusus dipilih, sebagai imunogenisitas tinggi mempromosikan cepat izin dari tubuh. Tositumomab adalah salah satu contoh digunakan untuk limfoma non-Hodgkins.
2. Antibodi-enzim diarahkan prodrug terapi (mahir)
Mahir melibatkan aplikasi terkait kanker antibodi monoklonal yang terkait dengan obat-mengaktifkan enzim.
Administrasi sistemik berikutnya non-agen beracun hasil dalam konversi ke obat beracun, dan menghasilkan efek sitotoksik yang dapat ditargetkan pada sel-sel ganas. keberhasilan klinis perawatan Adept telah dibatasi to-date. Namun hal itu memegang janji yang besar, dan laporan baru-baru ini menunjukkan bahwa hal itu akan memiliki peran dalam pengobatan kanker masa depan.
3. Obat dan terapi gen: Immuno-liposomes
Immunoliposomes adalah antibodi-conjugated liposomes.Liposomes dapat membawa obat-obatan atau perawatan nukleotida dan ketika dikonjugasikan dengan antibodi monoklonal, dapat diarahkan untuk melawan sel-sel ganas. Meskipun teknik ini masih dalam masa bayi, kemajuan signifikan telah dibuat.
Jaringan gen spesifik menggunakan immunoliposomes pengiriman juga telah dicapai di otak, dan jaringan kanker payudara. Immunoliposomes telah berhasil digunakan dalam vivo untuk mencapai target pengiriman gen penekan tumor ke dalam tumor, menggunakan fragmen antibodi terhadap manusia transferin reseptor.
4. Terapi Antibodi monoklonal Pasar Masa Depan
Sejak tahun 2000, pasar terapi antibodi monoklonal telah tumbuh secara eksponensial. Saat ini "5 besar" terapeutik antibodi di pasar: Avastin, Herceptin (baik onkologi), Humira, Remicade (baik autoimmune dan Penyakit Infeksi 'AIID') dan Rituxan (onkologi dan AIID) menyumbang 80% dari pendapatan pada tahun 2006. Sementara terapi Onkologi mendominasi pasar pada tahun 2004, diharapkan AIID mendominasi pada tahun 2011. [11] Para ahli meramalkan bahwa pasar antibodi terapeutik akan terus didominasi oleh Onkologi dan AIID segmen (82-84 persen) 2004-2011.
Selain itu, para ahli mencatat potensi perubahan dalam keseimbangan antara Onkologi dan AIID di tahun-tahun mendatang. Dalam waktu dekat, kemungkinan bahwa Genentech / Roche akan mempertahankan kontrol mereka terhadap pasar (karena kepemilikan 3 dari "big 5" produk), onkologi dan AIID akan tetap fokus mAb terapeutik segmen (karena ini adalah penyakit daerah ditangani oleh besar 5) dan tiga yang paling penting secara komersial 'target' untuk kelas mAb akan VEGF (Avastin), TNF-alfa (Remicade dan Humira) dan CD20 (Rituxan).
F. MACAM-MACAM ANTIBODI MONOKLONAL
1. ANTIBODI MONOKLONAL MURNI
antibodi monoklonal murni adalah antibodi yang penggunaanya tanpa dikombinasikan dengan obat lain atau material radioaktif. Antibodi murni mengikatkan diri mereka pada antigen spesifik milik sel-sel kanker dengan berbagai cara. Misalnya, memberi tanda pada sel kanker agar bisa dikenali dan dirusak oleh sistem imun tubuh. Cara lain dengan mengikatkan diri pada antigen tertentu yang disebut reseptor, tempat di mana molekul-molekul yang berfungsi menstimulasi pertumbuhan sel kanker juga akan mengikatkan diri.
Dengan menghambat molekul-molekul pertumbuhan untuk tidak mengikatkan diri, maka antibodi monoklonal ini sama saja mencegah sel kanker untuk tumbuh dengan cepat. Trastuzumab (Herceptin), yang merupakan MAb murni dan digunakan untuk kanker payudara stadium lanjut, adalah contoh antibodi monoklonal yang bekerja dengan cara ini(1)
Beberapa MAbs murni yang sudah disetujui FDA antara lain :
1. Rituximab (Rituxan): Rituximab digunakan untuk terapi sel B pada non-Hodgkin lymphoma. Agen ini merupakan antibodi monoklonal dengan sasaran antigen CD20, yang ditemukan pada sel B.
2. Trastuzumab (Herceptin): Trastuzumab adalah antibodi yang menyerang protein HER2. Protein ini terlihat dalam jumlah besar pada sel-sel beberapa kasus kanker payudara. Agen ini disetujui untuk pengobatan tahap lanjut kanker payudara.
3. Alemtuzumab (Campath): Alemtuzumab merupakan antibodi yang menyerang antigen CD52, yang terlihat pada sel B maupun sel T. Agen ini digunakan untuk terapi B cell lymphocytic leukemia (B-CLL) kronik yang sudah mendapat kemoterapi.
4. Cetuximab (Erbitux): Cetuximab, antibodi dengan sasaran protein EGFR (epidermal growth factor receptors). EFGR nampak dalam jumlah besar pada beberapa sel kanker. Agen ini digunakan berbarengan dengan obat kemoterapi irinotecan untuk kanker kolorektal stadium lanjut. Selain itu juga digunakan untuk terapi kanker leher dan kepala yang tidak bisa diselesaikan dengan bedah.
5. Bevacizumab (Avastin): Bevacizumab bekerja melawan protein VEGF (Vascular Endhotelial Growth Factor) yang normalnya membantu tumor membangun jaringan pembuluh darah baru (proses angiogenesis) sebagai satu cara mendapatkan oksigen dan nutrisi. Terapi anti-angiogenesis ini digunakan bersama-sama dengan kemoterapi untuk terapi kanker kolorektal metastatik.
Kemajuan pengobatan dengan antibodi melalui serangakain uji klinis sungguh suatu langkah yang berani. Antibodi ini bisa membantu pasien kanker yang tidak mengalami kemajuan dengan terapi standar. Berbagai uji klinis menunjukkan obat ini efektif, dan kemungkinan bisa digunakan sebagai terapi standart (awal) atau sebagai terapi tambahan pada kemoterapi.
Efek samping
Antibodi monoklonal diberikan intravena. Dibandingkan dengan efek samping kemoterapi, efek samping naked MAbs atau MAbs murni biasanya lebih ringan dan sering dikaitkan dengan reaksi “alergi”. Efek ini terlihat biasanya di awal terapi, misalnya demam, menggigil, lemah, nyeri kepala, mual, muntah, diare, tekanan darah turun, dan rashes. Beberapa MAbs juga bisa berimbas pada sumsum tulang seperti halnya pada pemberian obat kemoterapi. Hal ini sebagai akibat rendahnya kadar sel darah. Efek samping ini bisa memicu peningkatan risiko pendarahan dan infeksi pada pasien.
2. Antibodi Monoklonal Kombinasi
Conjugated monoclonal antibodies adalahantibodi yang dikombinasikan dengan berbagai jenis obat, toksin, dan materi-materi radioaktif. Obat ini hanya berperan sebagai “kendaraan” yang akan mengantarkan substansi-substansi obat, racun, dan materi radioaktif, menuju langsung ke sasaran yakni sel-sel kanker. Antibodi monoklonal jenis ini akan berkeliling ke seluruh bagian tubuh sampai ia berhasil menemukan sel kanker yang cocok dengan antigen yang ia bawa. Agen ini kemudian akan menghantarkan racun di tempat paling krusial, namun hebatnya, ia bisa meminimalkan dosis pada sel normal untuk menghindari kerusakan di seluruh bagian tubuh. Sayangnya, antibodi gabungan ini secara umum masih menimbulkan efek samping lebih banyak dibandingkan antibodi monoklonal yang murni. Efek yang ditimbulkan tergantung pada tipe substansi yang ikut serta atau menempel padanya.
Conjugated MAbs kadang dikenal juga sebagai "tagged," "labeled," atau "loaded" antibodies. Perbedaannya sebagai berikut:
MAbs yang dikombinasikan dengan obat-obat kemoterapi disebut chemolabeled. Saat ini agen ini hanya tersedia di Amerika Serikat, itupun hanya dalam rangka uji klinis.
MAbs yang dikombinasikan dengan partikel radioaktif disebut radiolabeled, dan tipe terapi ini sering juga disebut radioimmunotherapy (RIT). Pada 2002, FDA menyetujui radiolabeled pertama yang boleh digunakan untuk terapi kanker (tak hanya untuk uji klinis) yakni Ibritumomab tiuxetan (Zevalin). Obat ini digunakan untuk terapi kanker B lymphocytes. Kini obat ini juga digunakan untuk terapi B cell non-Hodgkin lymphoma yang tidak mempan dengan terapi standar.
Radiolabeled kedua yang disetujui FDA adalah tositumomab (Bexxar), pada 2003. Obat ini digunakan untuk tipe tertentu non-Hodgkin lymphoma yang juga tidak menunjukkan respon dengan rituximab (Rituxan) atau kemoterapi.
Di samping untuk kanker, antibodi radiolabeled juga digunakan bersamaan dengan kamera khusus untuk mendeteksi penyebaran sel kanker dalam tubuh. Penggunaannya sudah disetujui FDA yakni OncoScint (untuk deteksi kanker kolorektal dan kanker ovarium) serta ProstaScint (deteksi kanker prostat).
MAbs yang melekat dengan racun disebut immunotoxins. Imunotoksin dibuat dengan menempelkan racun-racun (berasal dari tanaman maupun bakteri) ke antibodi monoklonal. Berbagai racun dibuat untuk ditempelkan pada antibosi monoklonal seperti diphtherial toxin (DT), pseudomonal exotoxin (PE40), atau yang dibuat dari tanaman yakni ricin A atau saporin.
Studi awal menunjukkan imunotoksin cukup menjanjikan untuk menyusutkan sebagian kecil kanker, khususnya limfoma. Namun masalah besar masih menunggu dipecahkan sebelum bentuk baru terapi kanker ini bisa digunakan secara luas.
Satu-satunya imunotoksin yang mendapat persetujuan FDA untuk terapi kanker adalah gemtuzumab ozogamicin (Mylotarg). Obat ini mengandung racun calicheamicin. Racun ini melekat pada antibodi yang langsung menuju sasaran antigen CD33, yang nampak pada sebagian besar sel leukemia. Saat ini Gemtuzumab digunakan untuk terapi myelogenous leukemia (AML) akut yang sudah menjalani kemoterapi atau tidak memenhui syarat untuk kemoterapi.
Imunotoksin lain yakni BL22, juga cukup menjanjikan melalui studi awal untuk terapi hairy cell leukemia, bahkan pada pasien yang tidak menunjukkan respon sama sekali dengan kemoterapi. Pada uji klinis awal, lebih dari dua pertiga pasien menunjukkan respon komplit terhadap pengobatan yang berlangsung 2 tahun. Uji klinis imunotoksin juga tengah berlangsung untuk jenis leukemia tertentu, limfoma, kanker otak, dan kanker lainnya.
Ilmuwan juga melakukan eksperimen dengan racun yang ada kaitannya dengan substansi serupa hormon, yang sering disebut growth factors. Banyak sel-sel kanker memiliki reseptor growth factor dalam jumlah besar di permukaan sel yang akan menstimulasi sel untuk reproduksi dan tumbuh dengan cepat.
Peneliti lantas mengupayakan kombinasi gen sehingga growth factor bisa menempel pada toksin. Saat kombinasi growth factors/toksin mencapai reseptor growth factor pada permukaan sel kanker, dia akan menyalurkan muatan racun ke dalam sel kanker dan membunuhnya. Konsep di belakang obat gabungan growth factors/toksin ini mirip dengan imunotoksin. Namun karena kombinasi growth factors/toksin ini tidak mengandung antibodi, obat ini tidak bisa diklasifikasikan sebagai imunotoksin.
Satu-satunya growth factors/toksin yang disetujui FDA sejauh ini adalah denileukin difitox (Ontax). Obat ini mengandung sitokin yang dikenal sebagai interleukin-2 (IL-2), yang dilekatkan ke toksin dari kuman dipteri. Denileukin diftitox digunakan untuk terapi jenis limfoma kulit (cutaneous T cell lymphoma) yang relatif jarang ditemukan.(qq)
BAB III
KESIMPULAN
Antibodi monoklonal adalah zat yang diproduksi oleh sel gabungan tipe tunggal yang memiliki kekhususan tambahan. Ini adalah komponen penting dari sistem kekebalan tubuh. Mereka dapat mengenali dan mengikat ke antigen yang spesifik
Antibody monoklonal adalah antibody yang melawan protein di daerah dan atau sel kanker. Antibodi monoklonal dibuat di laboratorium khusus untuk melawan antigen tertentu. Karena tiap jenis kanker mengeluarkan antigen yang berbeda, maka berbeda pula antibody yang digunakan.
Antibodi monoklonal juga dapat mempengaruhi cell growth factors, karenanya dapat digunakan untuk menghambat pertumbuhan sel-sel tumor. Jika dipadu dengan radioisotop, obat kemoterapi, atau imunotoksin, setelah menemukan antigen yang dicari antibodi monoklonal langsung membunuh sel pembuatnya (kanker).
DAFTARA PUSTAKA
1. http://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1811523-antibodi-monoklonal-strategi-melawan-kanker
2. Waldmann, Thomas A. (2003). "Imunoterapi: masa lalu, sekarang dan masa depan". Nature Medicine 9: 269-277.
3. Janeway, Charles ; Paul Travers, Mark Walport, and Mark Shlomchik (2001). Immunobiology; Fifth Edition .
4. Janeway CA, Jr et al. (2005). Immunobiology. (6th ed.). Garland Science. ISBN 0-443-07310-4 . Garland Science. ISBN 0-443-07310-4.
5. Modified from Carter P: Improving the efficacy of antibody-based cancer therapies. Dimodifikasi dari Carter P Nat Rev Cancer 2001;1:118-129 Nat Rev Cancer 2001; 1:118-129
6. Kohler G, Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity Nature 1975; 256: 495-497 Nature 1975; 256: 495-497
7. Nadler LM, Stashenko P, Hardy R, et al. ^ Nadler LM, Stashenko P, Hardy R, et al. Serotherapy of a patient with a monoclonal antibody directed against a human lymphoma associated antigen. Cancer Res 1980; 40: 3147-3154. Cancer Res 1980; 40: 3.147-3.154.
8. Stern M, Herrmann R. Overview of monoclonal antibodies in cancer therapy: present and promise. Crit Rev Oncol Hematol 2005; 54: 11-29.
9. Hudson PJ, C. Engineered Souriau antibodi. Nat Med 2003; 9: 129-134.
10. Carter P, Presta L, Gorman CM, et al. ^ Carter P, Presta L, Gorman CM, et al. Humanization of an Anti-p185HER2 Antibody for Human Cancer Therapy. Proc Natl Acad Sci USA 1992; 89: 4285-4289.
11. DataMonitor "Monoclonal Antibodies Report Part 1" June 2007, Reference Code: DMHC2291
12. Anonym target terapi pada kanker. http://www.majalah-farmacia.com/rubrik/one_news_print.asp?IDNews=282
PENDAHULUAN
Antibodi monoklonal adalah zat yang diproduksi oleh sel gabungan tipe tunggal yang memiliki kekhususan tambahan. Ini adalah komponen penting dari sistem kekebalan tubuh. Mereka dapat mengenali dan mengikat ke antigen yang spesifik. Pada teknologi antibodi monklonal, sel tumor yang dapat mereplikasi tanpa henti digabungkan dengan sel mamalia yang memproduksi antibodi. Hasil penggabungan sel ini adalah hybridoma, yang akan terus memproduksi antibodi. Antibodi monoklonal mengenali setiap determinan yang antigen (bagian dari makromolekul yang dikenali oleh sistem kekebalan tubuh / epitope). Mereka menyerang molekul targetnya dan mereka bisa memilah antara epitope yang sama. Selain sangat spesifik, mereka memberikan landasan untuk perlindungan melawan patogen. Antibodi monoklonal sekarang telah digunakan untuk banyak masalah diagnostik seperti :
1. mengidentifikasi agen infeksi,
2. mengidentifikasi tumor, antigen dan antibodi auto,
3. mengukur protein dan level drug pada serum,
4. mengenali darah dan jaringan,
5. mengidentifikasi sel spesifik yang terlibat dalam respon kekebalan dan mengidentifikasi serta mengkuantifikasi hormon.( http://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1811523-antibodi-monoklonal-strategi-melawan-kanker/)
Terapi antibodi monoklonal merupakan bentuk pasif dari imunoterapi, karena antibodi dibuat dalam kuantitas besar di luar tubuh (di laboratorium). Jadi terapi ini tidak membutuhkan sistem imun pasien untuk bersikap aktif melawan kanker.
Antibodi diproduksi secara masal dalam laboratorium dengan menggabungkan sel myeloma (tipe kanker sumsum tulang) dari sel B mencit yang menghasilkan antibodi spesifik. Sel hasil penggabungan ini disebut hybridoma.
Kombinasi sel B yang bisa mengenali antigen khusus dan sel myeloma yang hidup akan membuat sel hibridoma menjadi semacam pabrik produksi antibodi yang tidak ada habisnya. Karena semua antibodi yang dihasilkan identik, berasal dari satu (mono) sel hibridoma, mereka disebut antibodi monoklonal (kadang disingkat MoAbs atau MAbs).
Ilmuwan bisa membuat antibodi monoklonal yang mampu bereaksi dengan antigen spesifik berbagai jenis sel kanker. Dengan ditemukannya lebih banyak lagi antigen kanker, berarti akan semakin banyak antibodi monoklonal yang bisa digunakan untuk terapi berbagai jenis kanker.
BAB II
PEMBAHASAN
A. Metode Produksi Antibodi monoklonal
Monoklonal antibodi (mAb) reagen penting digunakan dalam penelitian biomedis, dalam diagnosis dan pengobatan penyakit seperti infeksi dan kanker. Antibodi ini diproduksi oleh sel garis atau klon yang diperoleh dari hewan yang telah diimunisasi dengan substansi yang merupakan subyek. Untuk menghasilkan mAb yang diinginkan, sel-sel harus ditumbuhkan dalam salah satu dari dua cara: melalui suntikan ke dalam rongga perut yang sesuai disiapkan sebuah tikus atau dengan kultur jaringan sel dalam botol plastik.
Metode tikus/mouse umumnya dikenal, dipahami dengan baik, dan banyak tersedia di banyak laboratorium; tetapi perlu hati-hati tikus menonton untuk meminimalkan rasa sakit atau tertekan bahwa beberapa baris sel yang berlebihan mendorong oleh akumulasi cairan (asites) di perut atau oleh invasi viscera.
Produksi antibodi monoklonal melibatkan in vivo atau in vitro prosedur atau kombinasi dari padanya. Sebelum produksi antibodi oleh metode tersebut, sel-sel hibrid yang akan menghasilkan antibodi yang dihasilkan.
B. Langkah-langkah dalam memproduksi sel-sel tersebut adalah sebagai berikut :
Langkah 1:
Imunisasi Mice dan Pemilihan Mouse Donatur untuk Generasi Hybridoma Sel
Tikus diimunisasi dengan antigen yang disiapkan untuk injeksi emulsifying baik oleh antigen dengan ajuvan lain atau dengan homogenisasi irisan gel yang berisi antigen. Intact Utuh sel, seluruh membran dan mikroorganisme kadang-kadang digunakan sebagai immunogens. Di hampir semua laboratorium, tikus yang digunakan untuk menghasilkan antibodi yang diinginkan. Secara umum, tikus diimunisasi setiap 2-3
minggu, tetapi protokol imunisasi bervariasi di antara peneliti. Ketika Titer antibodi yang cukup tercapai
dalam serum, tikus yang diimunisasi dieuthanasia dan limpa dihapus untuk digunakan sebagai sumber sel untuk fusi dengan sel-sel myeloma.
Langkah 2:
Pemutaran dari Mouse untuk Produksi Antibodi Setelah beberapa minggu imunisasi, sampel darah yang diperoleh dari tikus untuk pengukuran serum antibodi manusiawi Beberapa teknik telah dikembangkan untuk pengumpulan darah volume kecil. Titer antibodi serum ditentukan dengan berbagai teknik, seperti:
enzim-linked Immunosorbent assay (ELISA) dan aliran cytometry. Jika titer antibodi tinggi, fusi sel dapat dilakukan. Jika Titer terlalu rendah, tikus dapat mendorong sampai respon yang memadai tercapai, Ketika Titer antibodi cukup tinggi, tikus yang umumnya
didukung dengan menyuntikkan antigen tanpa ajuvan intraperitoneally atau intravena (melalui vena ekor) 3 hari sebelum fusi tetapi 2 minggu setelah imunisasi sebelumnya. Kemudian tikus dieuthanasia dan limpa dihapus karena in vitro produksi sel hybridoma.
Langkah 3:
Persiapan Myeloma Cel
Sekering antibodi yang memproduksi sel-sel limpa, yang memiliki hidup terbatas, dengan sel-sel yang berasal dari abadi tumor limfosit (myeloma) menghasilkan hybridoma yang mampu pertumbuhan terbatas Sel-sel myeloma diabadikan sel yang berbudaya dengan 8-azaguanine untuk memastikan kepekaan terhadap mereka hypoxanthine-aminopterin-timidin (HAT) pilihan media yang digunakan setelah fusi sel 1, seminggu sebelum sel fusi, sel-sel myeloma ditanam di 8-azaguanine.
Langkah 4:
Fusion of Myeloma Cells dengan Limpa Immune Cel
Sel Tunggal limpa dari tikus yang diimunisasi adalah melebur dengan sel myeloma disiapkan sebelumnya Fusion dicapai oleh rekan-centrifuging baru dipanen sel-sel limpa dan sel-sel myeloma polietilenglycol, suatu zat yang menyebabkan membran sel untuk sumbu. Seperti tercantum dalam langkah 3, hanya sel-sel melebur akan tumbuh dalam media seleksi khusus. Sel-sel kemudian didistribusikan ke 96 piring berisi.
Sel pengumpan diturunkan dari salin mencuci peritoneum tikus. dipercaya untuk memasok faktor-faktor yang mendorong pertumbuhan sel hybridoma (Quinlan dan Kennedy 1994). Komersial persiapan bahwa hasil dari koleksi media mendukung pertumbuhan sel-sel berbudaya dan mengandung faktor pertumbuhan yang tersedia yang dapat digunakan sebagai pengganti mouse yang diturunkan dari sel-sel feeder. Hal ini juga memungkinkan untuk menggunakan murine yang diturunkan dari sumsum tulang makrofag sebagai sel feeder (Hoffman dan lain-lain 1996)
Langkah 5:
Mengkloning dari Hybridoma Cell Lines oleh "Membatasi Pengenceran" atau Perluasan dan Stabilisasi
Production Klon oleh asites Produksi
Pada langkah ini baru, hybridoma kelompok kecil sel-sel dari 96 piring dengan baik dapat tumbuh dalam jaringan budaya diikuti dengan seleksi untuk mengikat antigen atau tumbuh oleh metode asites mouse dengan kloning pada waktu. Kloning oleh "membatasi pengenceran" saat ini menjamin bahwa mayoritas sumur masing-masing mengandung paling banyak satu klon tunggal. Penilaian yang cukup besar diperlukan pada tahap ini untuk memilih hybridomas mampu ekspansi versus total kerugian dari produk fusi sel karena underpopulation atau tidak memadai dalam pertumbuhan vitro tinggi. Dalam beberapa kasus, antibodi yang dikeluarkan beracun bagi sel rapuh dipertahankan in vitro. Optimizing Mengoptimalkan asites mouse metode ekspansi pada tahap ini dapat menyimpan sel. Itu adalah pengalaman dari banyak bahwa singkat pertumbuhan dengan metode asites mouse sel menghasilkan baris yang di kemudian in vitro dan in vivo tahap menunjukkan sifat tahan banting dan optimal meningkatkan produksi antibodi (Ishaque dan Al-Rubeai 1998). Panduan dipublikasikan untuk membantu peneliti dalam menggunakan metode asites mouse dengan cara ini (Jackson dan Fox 1995). (1)
C. Terapi antibodi monoklonal
1. Antibodi monoklonal
Penggunaan antibodi monoklonal (atau mAb) untuk secara khusus mengikat sel sasaran, ini memungkinkan kemudian pasien merangsang sistem kekebalan tubuh untuk menyerang sel-sel patogen.
Sebagai contoh: mAb terapi dapat digunakan untuk menghancurkan tumor ganas sel dan mencegah pertumbuhan tumor dengan menghambat reseptor sel spesifik.
Ada sejumlah cara yang dapat digunakan untuk terapi.Adalah mungkin untuk menciptakan mAb khusus untuk hampir semua ekstraselular / permukaan sel sasaran, dan dengan demikian ada sejumlah besar penelitian dan pengembangan yang saat ini sedang menjalani proses menciptakan monoclonal untuk berbagai penyakit serius (seperti rheumatoid arthritis, multiple sclerosis dan berbagai jenis kanker). Variasi juga ada dalam perawatan ini, misalnya radioimmunotherapy, di mana radioaktif dosis localizes pada garis sel target, memberikan dosis kimia mematikan ke sasaran. [2]
2. Struktur dan fungsi manusia dan terapeutik antibodi
Imunoglobulin G (IgG) antibodi besar heterodimeric molekul, sekitar 150 kDa dan terdiri dari dua macam polipeptida rantai, disebut berat (~ 50kDa) dan rantai ringan (~ 25kDa).
Ada dua jenis rantai cahaya, kappa (κ) dan lamda (λ). Dengan pembelahan dengan enzim papain, yang Fab (fragmen antigen-mengikat) bagian dapat dipisahkan dari Fc (fragmen kristal) bagian dari molekul (lihat gambar). Fragmen Fab berisi variabel domain, yang terdiri dari tiga hypervariable asam amino domain yang bertanggung jawab atas spesifisitas antibodi tertanam ke daerah konstan.
Ada empat subkelas IgG yang dikenal semua yang terlibat dalam selular tergantung Antibodi-cytotoxicity. [3] Sistem kekebalan merespon faktor-faktor lingkungan itu menemukan berdasarkan diskriminasi antara diri sendiri dan non-self. Tumor sel-sel yang tidak secara khusus ditargetkan oleh salah satu sistem kekebalan tubuh karena sel tumor adalah sel-sel pasien sendiri.
Sel-sel tumor, tetapi sangat tidak normal, tidak biasa dan banyak menampilkan antigen yang tidak sesuai baik untuk tipe sel, lingkungan, atau hanya biasanya hadir dalam organisme 'pembangunan (misalnya janin antigen). [3]
Sel tumor lain menampilkan reseptor permukaan sel yang jarang atau tidak ada pada permukaan sel-sel sehat, dan yang bertanggung jawab untuk mengaktifkan selular transduksi sinyal jalur yang menyebabkan pertumbuhan yang tidak diatur dan pembagian sel tumor. Contohnya termasuk ErbB2, sebuah konstitutif aktif reseptor permukaan sel yang abnormal diproduksi di tingkat tinggi di permukaan sekitar 30% dari kanker payudara sel tumor. Seperti kanker payudara yang dikenal sebuah HER2 positif kanker payudara. [4]
Antibodi adalah komponen kunci dari respon imun adaptif, memainkan peran sentral dalam baik dalam pengakuan terhadap antigen asing dan stimulasi respon imun kepada mereka. Munculnya antibodi monoklonal teknologi telah memungkinkan untuk meningkatkan antibodi terhadap antigen tertentu disajikan pada permukaan tumor.
D. Asal terapi antibodi monoklonal
1. Antibodi monoklonal untuk kanker.
Antibodi yang diarahkan prodrug terapi enzim; ADCC, tergantung antibodi yang diperantarai sel-cytotoxicity; CDC, melengkapi tergantung cytotoxicity; MAB, monoklonal antibodi; scFv, Fv rantai tunggal fragmen. [5]
Immunotherapy dikembangkan sebagai suatu teknik dengan penemuan struktur antibodi dan pengembangan hybridoma teknologi, yang menyediakan sumber terpercaya pertama monoklonal antibodi. [6] kemajuan ini diperbolehkan untuk penargetan tumor tertentu baik secara in vitro dan in vivo. Penelitian awal ganas neoplasma ditemukan MAB terapi yang terbatas dan umumnya berumur pendek sukses dengan keganasan darah. [7] [8] Selain harus perawatan secara khusus disesuaikan dengan masing-masing pasien, sehingga terbukti tidak praktis untuk rutin klinis .
Sepanjang perkembangan monoklonal pengembangan obat ada empat jenis antibodi utama dikembangkan: murine, chimeric, humanised dan manusia. Awal terapeutik antibodi murine sederhana analog, yang menyebabkan kurangnya awal kesuksesan.
Sejak itu telah menunjukkan bahwa antibodi ini memiliki: pendek paruh in vivo (karena kompleks imun pembentukan), terbatas penetrasi ke situs tumor, dan bahwa mereka tidak cukup merekrut fungsi efektor tuan rumah. [9] Untuk mengatasi kesulitan-kesulitan ini masalah teknis awalnya berpengalaman harus dilampaui.
Antibodi Chimeric dan manusiawi diganti murine umumnya antibodi dalam aplikasi antibodi terapi modern. Teknologi Hybridoma telah digantikan oleh teknologi DNA rekombinan, transgenik tikus dan tampilan fag. [10] Pemahaman proteomics telah terbukti penting dalam mengidentifikasi tumor novel target.
2. Antibodi monoklonal murine (akhiran ~ omab)
Awalnya, murine antibodi yang diperoleh oleh hybridoma teknologi, yang Kohler dan Milstein menerima hadiah Nobel. Namun ketidaksamaan antara murine dan sistem kekebalan tubuh manusia menyebabkan kegagalan klinis antibodi ini, kecuali dalam keadaan tertentu.
Masalah utama yang berhubungan dengan antibodi murine termasuk mengurangi rangsangan cytotoxicity dan terbentuknya administrasi kompleks setelah berkali-kali, yang mengakibatkan ringan reaksi alergi dan kadang-kadang anafilaksis shock. [9]
3. Chimeric dan monoklonal antibody manusia (akhiran ximab, ~ zumab masing-masing)
Untuk mengurangi antibodi murine imunogenisitas, murine molekul yang direkayasa untuk menghapus konten imunogenik dan untuk meningkatkan efisiensi kekebalan. [9] ini awalnya dicapai oleh produksi chimeric dan manusiawi antibodi. Antibodi Chimeric terdiri dari variabel murine daerah menyatu ke daerah konstan manusia
Urutan gen manusia, diambil dari cahaya kappa rantai dan rantai berat IgG1, menghasilkan antibodi yang kira-kira 65% manusia. Hal ini akan mengurangi imunogenisitas, dan dengan demikian meningkatkan serum paruh.
Antibodi manusia diproduksi oleh mencangkok murine hypervariable asam amino domain dalam antibodi manusia. This results in a molecule of approximately 95% human origin. Ini menghasilkan molekul sekitar 95% asal-usul manusia. Namun hal itu telah ditunjukkan dalam beberapa studi yang mengikat antigen antibodi humanised jauh lebih lemah daripada antibodi monoklonal murine orangtua, dengan melaporkan penurunan afinitas sampai beberapa seratus kali lipat. [10] Peningkatan antibodi-antigen kekuatan mengikat telah dicapai dengan memperkenalkan mutasi ke daerah menentukan saling melengkapi (CDR) , dengan menggunakan teknik seperti rantai-shuffling, pengacakan saling melengkapi penentuan daerah dan generasi dari perpustakaan antibodi dengan variabel mutasi dalam daerah dengan rawan kesalahan PCR, E-coli strain mutator , dan situs-mutagenesis spesifik. [1]
4. Antibodi monoklonal Manusia
Antibodi monoklonal manusia yang diproduksi menggunakan transgenik tikus atau tampilan fag perpustakaan.
Antibodi monoklonal manusia yang diproduksi dengan mentransfer gen imunoglobulin manusia ke dalam genom murine, setelah mana mouse transgenik vaksinasi terhadap antigen yang diinginkan, menyebabkan produksi antibodi monoklonal. [10] memperbolehkan transformasi murine antibodi in vitro menjadi manusia sepenuhnya antibodi . [4]
E. Persetujuan FDA Terhadap terapi antibodi
Pertama terapi yang disetujui FDA adalah antibodi monoklonal murine spesifik IgG2a CD3 penolakan transplantasi obat, OKT3 (juga disebut muromonab), pada tahun 1986.
Contoh terapi antibodi monoklonal yang disetujuia FDA
Sebagian besar berkaitan dengan target imunologi dan kanker. penemuan obat ini digunakan dalam padat transplantasi organ penerima yang menjadi steroid resisten.
Antibodi Merek Tanggal persetujuan Tipe Target Indikasi
(Apa itu disetujui untuk mengobati)
Abciximab
ReoPro 1994 chimeric penghambatan glikoprotein IIb / IIIA Kardiovaskular
Adalimumab
Humira 2002 manusia inhibisi dari TNF-α signaling Beberapa gangguan auto-imun
Alemtuzumab
Campath 2001 manusiawi CD52
Leukemia limfositik kronis
Basiliximab
Simulect 1998 chimeric IL-2Rα reseptor (CD25)
Penolakan transplantasi
Bevacizumab
Avastin 2004 manusiawi Vascular endothelial growth factor (VEGF)
Kanker kolorektal
Cetuximab
Erbitux 2004 chimeric faktor pertumbuhan epidermal reseptor
Kanker kolorektal, kanker Kepala dan leher
Certolizumab pegol
Cimzia 2008 manusiawi signaling inhibisi dari TNF-α signaling Crohn
Tabel 1. Contoh Produk Antibodi monoklonal
1. Radioimmunotherapy (RIT)
Radioimmunotherapy melibatkan penggunaan radioaktif murine dikonjugasikan antibodi terhadap antigen selular. Sebagian besar penelitian saat ini terlibat aplikasi mereka untuk limfoma, karena ini sangat radio sensitive. Untuk membatasi paparan radiasi, murine antibodi secara khusus dipilih, sebagai imunogenisitas tinggi mempromosikan cepat izin dari tubuh. Tositumomab adalah salah satu contoh digunakan untuk limfoma non-Hodgkins.
2. Antibodi-enzim diarahkan prodrug terapi (mahir)
Mahir melibatkan aplikasi terkait kanker antibodi monoklonal yang terkait dengan obat-mengaktifkan enzim.
Administrasi sistemik berikutnya non-agen beracun hasil dalam konversi ke obat beracun, dan menghasilkan efek sitotoksik yang dapat ditargetkan pada sel-sel ganas. keberhasilan klinis perawatan Adept telah dibatasi to-date. Namun hal itu memegang janji yang besar, dan laporan baru-baru ini menunjukkan bahwa hal itu akan memiliki peran dalam pengobatan kanker masa depan.
3. Obat dan terapi gen: Immuno-liposomes
Immunoliposomes adalah antibodi-conjugated liposomes.Liposomes dapat membawa obat-obatan atau perawatan nukleotida dan ketika dikonjugasikan dengan antibodi monoklonal, dapat diarahkan untuk melawan sel-sel ganas. Meskipun teknik ini masih dalam masa bayi, kemajuan signifikan telah dibuat.
Jaringan gen spesifik menggunakan immunoliposomes pengiriman juga telah dicapai di otak, dan jaringan kanker payudara. Immunoliposomes telah berhasil digunakan dalam vivo untuk mencapai target pengiriman gen penekan tumor ke dalam tumor, menggunakan fragmen antibodi terhadap manusia transferin reseptor.
4. Terapi Antibodi monoklonal Pasar Masa Depan
Sejak tahun 2000, pasar terapi antibodi monoklonal telah tumbuh secara eksponensial. Saat ini "5 besar" terapeutik antibodi di pasar: Avastin, Herceptin (baik onkologi), Humira, Remicade (baik autoimmune dan Penyakit Infeksi 'AIID') dan Rituxan (onkologi dan AIID) menyumbang 80% dari pendapatan pada tahun 2006. Sementara terapi Onkologi mendominasi pasar pada tahun 2004, diharapkan AIID mendominasi pada tahun 2011. [11] Para ahli meramalkan bahwa pasar antibodi terapeutik akan terus didominasi oleh Onkologi dan AIID segmen (82-84 persen) 2004-2011.
Selain itu, para ahli mencatat potensi perubahan dalam keseimbangan antara Onkologi dan AIID di tahun-tahun mendatang. Dalam waktu dekat, kemungkinan bahwa Genentech / Roche akan mempertahankan kontrol mereka terhadap pasar (karena kepemilikan 3 dari "big 5" produk), onkologi dan AIID akan tetap fokus mAb terapeutik segmen (karena ini adalah penyakit daerah ditangani oleh besar 5) dan tiga yang paling penting secara komersial 'target' untuk kelas mAb akan VEGF (Avastin), TNF-alfa (Remicade dan Humira) dan CD20 (Rituxan).
F. MACAM-MACAM ANTIBODI MONOKLONAL
1. ANTIBODI MONOKLONAL MURNI
antibodi monoklonal murni adalah antibodi yang penggunaanya tanpa dikombinasikan dengan obat lain atau material radioaktif. Antibodi murni mengikatkan diri mereka pada antigen spesifik milik sel-sel kanker dengan berbagai cara. Misalnya, memberi tanda pada sel kanker agar bisa dikenali dan dirusak oleh sistem imun tubuh. Cara lain dengan mengikatkan diri pada antigen tertentu yang disebut reseptor, tempat di mana molekul-molekul yang berfungsi menstimulasi pertumbuhan sel kanker juga akan mengikatkan diri.
Dengan menghambat molekul-molekul pertumbuhan untuk tidak mengikatkan diri, maka antibodi monoklonal ini sama saja mencegah sel kanker untuk tumbuh dengan cepat. Trastuzumab (Herceptin), yang merupakan MAb murni dan digunakan untuk kanker payudara stadium lanjut, adalah contoh antibodi monoklonal yang bekerja dengan cara ini(1)
Beberapa MAbs murni yang sudah disetujui FDA antara lain :
1. Rituximab (Rituxan): Rituximab digunakan untuk terapi sel B pada non-Hodgkin lymphoma. Agen ini merupakan antibodi monoklonal dengan sasaran antigen CD20, yang ditemukan pada sel B.
2. Trastuzumab (Herceptin): Trastuzumab adalah antibodi yang menyerang protein HER2. Protein ini terlihat dalam jumlah besar pada sel-sel beberapa kasus kanker payudara. Agen ini disetujui untuk pengobatan tahap lanjut kanker payudara.
3. Alemtuzumab (Campath): Alemtuzumab merupakan antibodi yang menyerang antigen CD52, yang terlihat pada sel B maupun sel T. Agen ini digunakan untuk terapi B cell lymphocytic leukemia (B-CLL) kronik yang sudah mendapat kemoterapi.
4. Cetuximab (Erbitux): Cetuximab, antibodi dengan sasaran protein EGFR (epidermal growth factor receptors). EFGR nampak dalam jumlah besar pada beberapa sel kanker. Agen ini digunakan berbarengan dengan obat kemoterapi irinotecan untuk kanker kolorektal stadium lanjut. Selain itu juga digunakan untuk terapi kanker leher dan kepala yang tidak bisa diselesaikan dengan bedah.
5. Bevacizumab (Avastin): Bevacizumab bekerja melawan protein VEGF (Vascular Endhotelial Growth Factor) yang normalnya membantu tumor membangun jaringan pembuluh darah baru (proses angiogenesis) sebagai satu cara mendapatkan oksigen dan nutrisi. Terapi anti-angiogenesis ini digunakan bersama-sama dengan kemoterapi untuk terapi kanker kolorektal metastatik.
Kemajuan pengobatan dengan antibodi melalui serangakain uji klinis sungguh suatu langkah yang berani. Antibodi ini bisa membantu pasien kanker yang tidak mengalami kemajuan dengan terapi standar. Berbagai uji klinis menunjukkan obat ini efektif, dan kemungkinan bisa digunakan sebagai terapi standart (awal) atau sebagai terapi tambahan pada kemoterapi.
Efek samping
Antibodi monoklonal diberikan intravena. Dibandingkan dengan efek samping kemoterapi, efek samping naked MAbs atau MAbs murni biasanya lebih ringan dan sering dikaitkan dengan reaksi “alergi”. Efek ini terlihat biasanya di awal terapi, misalnya demam, menggigil, lemah, nyeri kepala, mual, muntah, diare, tekanan darah turun, dan rashes. Beberapa MAbs juga bisa berimbas pada sumsum tulang seperti halnya pada pemberian obat kemoterapi. Hal ini sebagai akibat rendahnya kadar sel darah. Efek samping ini bisa memicu peningkatan risiko pendarahan dan infeksi pada pasien.
2. Antibodi Monoklonal Kombinasi
Conjugated monoclonal antibodies adalahantibodi yang dikombinasikan dengan berbagai jenis obat, toksin, dan materi-materi radioaktif. Obat ini hanya berperan sebagai “kendaraan” yang akan mengantarkan substansi-substansi obat, racun, dan materi radioaktif, menuju langsung ke sasaran yakni sel-sel kanker. Antibodi monoklonal jenis ini akan berkeliling ke seluruh bagian tubuh sampai ia berhasil menemukan sel kanker yang cocok dengan antigen yang ia bawa. Agen ini kemudian akan menghantarkan racun di tempat paling krusial, namun hebatnya, ia bisa meminimalkan dosis pada sel normal untuk menghindari kerusakan di seluruh bagian tubuh. Sayangnya, antibodi gabungan ini secara umum masih menimbulkan efek samping lebih banyak dibandingkan antibodi monoklonal yang murni. Efek yang ditimbulkan tergantung pada tipe substansi yang ikut serta atau menempel padanya.
Conjugated MAbs kadang dikenal juga sebagai "tagged," "labeled," atau "loaded" antibodies. Perbedaannya sebagai berikut:
MAbs yang dikombinasikan dengan obat-obat kemoterapi disebut chemolabeled. Saat ini agen ini hanya tersedia di Amerika Serikat, itupun hanya dalam rangka uji klinis.
MAbs yang dikombinasikan dengan partikel radioaktif disebut radiolabeled, dan tipe terapi ini sering juga disebut radioimmunotherapy (RIT). Pada 2002, FDA menyetujui radiolabeled pertama yang boleh digunakan untuk terapi kanker (tak hanya untuk uji klinis) yakni Ibritumomab tiuxetan (Zevalin). Obat ini digunakan untuk terapi kanker B lymphocytes. Kini obat ini juga digunakan untuk terapi B cell non-Hodgkin lymphoma yang tidak mempan dengan terapi standar.
Radiolabeled kedua yang disetujui FDA adalah tositumomab (Bexxar), pada 2003. Obat ini digunakan untuk tipe tertentu non-Hodgkin lymphoma yang juga tidak menunjukkan respon dengan rituximab (Rituxan) atau kemoterapi.
Di samping untuk kanker, antibodi radiolabeled juga digunakan bersamaan dengan kamera khusus untuk mendeteksi penyebaran sel kanker dalam tubuh. Penggunaannya sudah disetujui FDA yakni OncoScint (untuk deteksi kanker kolorektal dan kanker ovarium) serta ProstaScint (deteksi kanker prostat).
MAbs yang melekat dengan racun disebut immunotoxins. Imunotoksin dibuat dengan menempelkan racun-racun (berasal dari tanaman maupun bakteri) ke antibodi monoklonal. Berbagai racun dibuat untuk ditempelkan pada antibosi monoklonal seperti diphtherial toxin (DT), pseudomonal exotoxin (PE40), atau yang dibuat dari tanaman yakni ricin A atau saporin.
Studi awal menunjukkan imunotoksin cukup menjanjikan untuk menyusutkan sebagian kecil kanker, khususnya limfoma. Namun masalah besar masih menunggu dipecahkan sebelum bentuk baru terapi kanker ini bisa digunakan secara luas.
Satu-satunya imunotoksin yang mendapat persetujuan FDA untuk terapi kanker adalah gemtuzumab ozogamicin (Mylotarg). Obat ini mengandung racun calicheamicin. Racun ini melekat pada antibodi yang langsung menuju sasaran antigen CD33, yang nampak pada sebagian besar sel leukemia. Saat ini Gemtuzumab digunakan untuk terapi myelogenous leukemia (AML) akut yang sudah menjalani kemoterapi atau tidak memenhui syarat untuk kemoterapi.
Imunotoksin lain yakni BL22, juga cukup menjanjikan melalui studi awal untuk terapi hairy cell leukemia, bahkan pada pasien yang tidak menunjukkan respon sama sekali dengan kemoterapi. Pada uji klinis awal, lebih dari dua pertiga pasien menunjukkan respon komplit terhadap pengobatan yang berlangsung 2 tahun. Uji klinis imunotoksin juga tengah berlangsung untuk jenis leukemia tertentu, limfoma, kanker otak, dan kanker lainnya.
Ilmuwan juga melakukan eksperimen dengan racun yang ada kaitannya dengan substansi serupa hormon, yang sering disebut growth factors. Banyak sel-sel kanker memiliki reseptor growth factor dalam jumlah besar di permukaan sel yang akan menstimulasi sel untuk reproduksi dan tumbuh dengan cepat.
Peneliti lantas mengupayakan kombinasi gen sehingga growth factor bisa menempel pada toksin. Saat kombinasi growth factors/toksin mencapai reseptor growth factor pada permukaan sel kanker, dia akan menyalurkan muatan racun ke dalam sel kanker dan membunuhnya. Konsep di belakang obat gabungan growth factors/toksin ini mirip dengan imunotoksin. Namun karena kombinasi growth factors/toksin ini tidak mengandung antibodi, obat ini tidak bisa diklasifikasikan sebagai imunotoksin.
Satu-satunya growth factors/toksin yang disetujui FDA sejauh ini adalah denileukin difitox (Ontax). Obat ini mengandung sitokin yang dikenal sebagai interleukin-2 (IL-2), yang dilekatkan ke toksin dari kuman dipteri. Denileukin diftitox digunakan untuk terapi jenis limfoma kulit (cutaneous T cell lymphoma) yang relatif jarang ditemukan.(qq)
BAB III
KESIMPULAN
Antibodi monoklonal adalah zat yang diproduksi oleh sel gabungan tipe tunggal yang memiliki kekhususan tambahan. Ini adalah komponen penting dari sistem kekebalan tubuh. Mereka dapat mengenali dan mengikat ke antigen yang spesifik
Antibody monoklonal adalah antibody yang melawan protein di daerah dan atau sel kanker. Antibodi monoklonal dibuat di laboratorium khusus untuk melawan antigen tertentu. Karena tiap jenis kanker mengeluarkan antigen yang berbeda, maka berbeda pula antibody yang digunakan.
Antibodi monoklonal juga dapat mempengaruhi cell growth factors, karenanya dapat digunakan untuk menghambat pertumbuhan sel-sel tumor. Jika dipadu dengan radioisotop, obat kemoterapi, atau imunotoksin, setelah menemukan antigen yang dicari antibodi monoklonal langsung membunuh sel pembuatnya (kanker).
DAFTARA PUSTAKA
1. http://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1811523-antibodi-monoklonal-strategi-melawan-kanker
2. Waldmann, Thomas A. (2003). "Imunoterapi: masa lalu, sekarang dan masa depan". Nature Medicine 9: 269-277.
3. Janeway, Charles ; Paul Travers, Mark Walport, and Mark Shlomchik (2001). Immunobiology; Fifth Edition .
4. Janeway CA, Jr et al. (2005). Immunobiology. (6th ed.). Garland Science. ISBN 0-443-07310-4 . Garland Science. ISBN 0-443-07310-4.
5. Modified from Carter P: Improving the efficacy of antibody-based cancer therapies. Dimodifikasi dari Carter P Nat Rev Cancer 2001;1:118-129 Nat Rev Cancer 2001; 1:118-129
6. Kohler G, Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity Nature 1975; 256: 495-497 Nature 1975; 256: 495-497
7. Nadler LM, Stashenko P, Hardy R, et al. ^ Nadler LM, Stashenko P, Hardy R, et al. Serotherapy of a patient with a monoclonal antibody directed against a human lymphoma associated antigen. Cancer Res 1980; 40: 3147-3154. Cancer Res 1980; 40: 3.147-3.154.
8. Stern M, Herrmann R. Overview of monoclonal antibodies in cancer therapy: present and promise. Crit Rev Oncol Hematol 2005; 54: 11-29.
9. Hudson PJ, C. Engineered Souriau antibodi. Nat Med 2003; 9: 129-134.
10. Carter P, Presta L, Gorman CM, et al. ^ Carter P, Presta L, Gorman CM, et al. Humanization of an Anti-p185HER2 Antibody for Human Cancer Therapy. Proc Natl Acad Sci USA 1992; 89: 4285-4289.
11. DataMonitor "Monoclonal Antibodies Report Part 1" June 2007, Reference Code: DMHC2291
12. Anonym target terapi pada kanker. http://www.majalah-farmacia.com/rubrik/one_news_print.asp?IDNews=282
Langganan:
Postingan (Atom)